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含消毒剂健康杀菌皂杀菌效果观察

作者:含消毒剂健康杀菌皂杀菌效果观察  来源:含消毒剂健康杀菌皂杀菌效果观察  发布时间:2010/1/19 15:58:44
含消毒剂健康杀菌皂杀菌效果观察
为了解健康杀菌皂的杀菌效果,进行了杀菌效果的观察。该健康杀菌皂(以下简称杀菌皂) 含2 ,4 ,4 - 三氯- 2 - 羟基二苯醚、天然油脂、表面活性剂、香料等成分。其观察结果如下。
1  方法
1.1  菌悬液的制备
1.1.1  细菌繁殖体悬液的制备 (1) 取冻干菌种管,在无菌操作下打开,以毛细吸管吸加适量营养肉汤培养基,反复吹吸,使菌种融化分散。取含5.0ml 营养肉汤培养基试管,滴入少许菌种悬液,置37 ℃培养18~24h。用接种环取第1 代培养的菌悬液,划线接种于营养琼脂培养基平板上,于37 ℃培养18~24h。挑取上述第2 代培养物中典型菌落,接种于营养琼脂斜面,于37 ℃培养18~24h ,即为第3 代培养物。(2) 取菌种第3~14 代的营养琼脂培养基斜面新鲜培养物( 18 ~ 24h) , 用510ml 吸管吸取5.0ml PBS 加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用5.0ml 吸管将洗液移至另一无菌试管中,在手掌上振敲80 次使细菌悬浮均匀。(3) 初步制成的菌悬液,可先用细菌浓度比浊测定法粗测其含菌浓度,然后以含1 %蛋白胨的PBS 稀释至所需使用的浓度。
1.1.2  白色念珠菌悬液的制备 (1) 取冻干菌种管,在无菌操作下打开,以毛细吸管吸加适量沙堡氏液体培养基于管中,反复吹吸,使菌种融化分散。取含5.0ml 沙堡氏液体培养基试管,滴入少许菌种悬液,置37 ℃培养18~24h。用接种环取第1 代培养的菌悬液,划线接种于沙堡氏琼脂培养基平板上,于37 ℃培养18~24h。挑取上述第2 代培养物中典型菌落,接种于沙堡氏琼脂斜面,于37 ℃培养18~24h ,即为第3 代培养物。(2) 取第3~14 代的沙堡氏琼脂培养基斜面新鲜培养物(18~24h) ,用510ml 吸管吸取5.0ml PBS 加入斜面试管内,反复吹吸,洗下菌苔。随后,用5.0ml 吸管将洗液移至另一无菌试管中,在手掌上振敲80 次,以使细菌悬浮均匀。(3) 将制成的菌悬液,进行活菌培养计数,按其结果用含1 %蛋白胨的PBS 稀释至所需浓度。
1.2  中和剂鉴定试验 试验菌为金黄色葡萄球菌(ATCC25923) 。试验设8 组,试验用5 %(W/ V) 杀菌皂溶液进行。评价规定: (1) 第1 组无试验菌,或仅有极少数试验菌菌落生长。(2) 第2 组有较第1 组为多,但较第3 、4 、5 组为少的试验菌菌落生长。(3) 第3 、4 、5 组有相似量试验菌生长,其组间菌落数误差率应不超过15 %。(4) 第6~8 组无菌生长。表明所选用中和剂及其浓度适宜。
1.3  细菌悬液杀菌试验 试验菌为金黄色葡萄球菌、大肠杆菌(ATCC 25922) 与白色念珠菌(ATCC 10231) 。
1.3.1  悬液定性杀菌试验 用定性消毒试验测最低杀菌浓度时,以对倍稀释法用无菌蒸馏水配制不同浓度的杀菌皂溶液。试验时,将2.5ml 杀菌皂溶液(对照为无菌蒸馏水) 与2.5ml 菌悬液混匀。置20 ℃水浴中,作用5min ,取0.5ml 菌药混合液,加入4.5ml 中和剂溶液中和作用10min ,取该液0.5ml 接种营养琼脂,于37 ℃培养(18~24h) (白色念珠菌接种沙氏培养基,于28 ℃培养) 。测最短杀菌时间时,将菌药按上述量混匀,作用后,吸取0.5ml 接种、培养及观察结果。
1.3.2  悬液定量杀菌试验 进行定量杀菌试验时,取5 %杀菌皂溶液4.5ml ,加入0.5ml 菌悬液中,混匀,作用至预定时间,取菌药混合液0.5ml ,加入4.5ml 中和剂溶液中和作用10min ,进行活菌计数,计算杀灭率。
1.4  自然菌手消毒试验 试验组用杀菌皂,清水洗手,于洗手前后,分别用浸以采样液(生理盐水) 的无菌棉拭子从指根到指尖往返擦拭并不断转动棉拭子进行采样。将采样后棉拭子头剪入盛有采样液的试管中,振打试管以洗脱棉拭子上细菌,取洗脱液作活菌计数,计算除菌率。
2  结果
2.1  中和剂选择试验结果 试验表明,用含2 %Na2S2O3 +2 %吐温80 + 0.5 %卵磷脂的磷酸盐缓冲溶液,中和5 %杀菌皂溶液符合所规定要求 。
2.2  杀菌效果 定性杀菌试验表明,以0.625 %杀菌皂溶液与菌悬液混匀,作用5min ,能将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与白色念珠菌杀灭,5 %杀菌皂溶液仅需作用2min ,即可将其杀灭。
定量杀菌试验表明,以5 %杀菌皂溶液作用2min ,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌与白色念球菌的杀灭率分别为99.67 %、99.42 %与75.07 %。
2.3  使用试验洗手效果 用杀菌皂洗手可将手表面自然菌减少58.36 %(洗手前后平均菌数分别为1 412 和588cfu/ 只手) 。
3  结语
试验结果表明,该杀菌皂溶液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌作用5min 的最低杀菌浓度为0.625 %;5 %杀菌皂溶液将3 种菌杀灭所需最短时间均为2min ,对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌杀灭率均达99 %以上,对白色念珠菌杀灭率为75 %;用该皂洗手,可使手面自然菌减少58 %。

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