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空气消毒剂中和试验方法的改进及现场消毒效果的观察

作者:本站  来源:新疆杀菌剂网  发布时间:2009/11/13 15:36:57
空气消毒剂中和试验方法的改进及现场消毒效果的观察
提要:空气消毒效果测定中,残留消毒剂的去除方法与其它消毒试验有所不同。为了探索更科学合理的空气消毒中和剂试验,采用空气消毒效果试验方法,以双链季铵盐为消毒剂代表,对常规中和剂试验方法进行了改进,并对双链季铵盐现场消毒效果进行观察。结果,现行常规试验方法对中和产物抑菌作用判定存在问题,改进后的中和剂试验方法提高了中和产物抑菌作用的检测敏感性。经试验观察,以2000 mg/L双季铵盐(双十烷基二甲基演化铵)溶液按8 ml/m3用量进行气溶胶喷雾,密闭作用30 min,对空气中自然菌消除率均为90% 以上。结论,改进的中和试验方法能更合理地避免中和产物对检测体系影响,有利于提高空气消毒剂消毒效果检测的准确性。2000mg/L双季铵盐溶液气溶胶喷雾可有效消除室内空气中自然菌达90% 以上。
关键词:空气消毒;中和试验;双链季铵盐;金黄色葡萄球菌
化学消毒剂用于空气消毒效果评价试验中,中和剂的正确选择和使用是决定评价准确性的重要因素之一。现行的《消毒技术规范》空气消毒效果鉴定试验的中和剂试验采用悬液或载体试验的中和试验方法鉴定,而空气消毒效果评价时,是将按上述方法确定的中和剂直接加入普通营养琼脂培养基,如此,中和剂或中和产物可能对试验菌有抑制作用。为研究更科学合理的空气消毒中和剂试验,采用空气消毒效果试验方法,以双链季铵盐为消毒剂代表,对常规中和剂试验方法进行了改进,并对双链季铵盐现场消毒效果进行观察。现将结果报告如下。
1 方法
1. 1菌悬液的制备
取金黄色葡萄球菌(ATCC 6538)(中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心提供)18~24h的营养琼脂新鲜斜面培养物,用含l g/L胰蛋白胨的生理盐水洗下并稀释制成菌悬液,用于中和剂试验。
中和剂载体试验用金黄色葡萄球菌试验菌悬液0.02 ml滴染灭菌白色平纹布片(10 mm x 10 mm),干燥后制成菌片备用。
1.2中和剂选择试验
试验用消毒剂为百毒杀消毒剂(上海派斯德生化有限公司生产),主成份为双十烷基二甲基溴化铵,含量为100 g/L,为无色透明液体,微芳香味,易溶于水。用标准硬水将双长链季铵盐配制成含2000 mg/L双十烷基二甲基溴化铵溶液。
1.2.1常规中和试验方法试验组设计和操作方法完全参照2002年版《消毒技术规范》规定的载体定量杀菌试验方法执行。
1.2.2改进中和试验方法试验用含中和剂的普通营养琼脂培养基,用9 cm直径的无菌平皿,制成平板,作为接种培养。试验设计5组,按下述试验程序进行,所有试验均在100级洁净室(空间16 m3)内进行,试验前净化时间不少于20 min。① 非中和组(消毒剂+不含中和剂的培养基+试验菌)即在室内空气喷雾消毒后(喷雾用2000 mg/L双链季铵盐,喷药量8 ml/m3)用不含中和剂的营养琼脂平板置于FA一1型空气微生物采样器内采集室内空气;采样后,于每组6级的各级平板上均滴加0.2 ml试验菌液,用无菌玻棒涂染均匀。② 中和剂组(无菌蒸馏水+含中和剂的培养基+试验菌)即在用蒸馏水进行室内气溶胶喷雾后,用含中和剂的营养琼脂平板置于采样器内进行采样,然后按上述方法接种细菌。③ 中和产物组(消毒剂+含中和剂的培养基+试验菌):即在室内空气喷雾消毒后,用含中和剂的营养琼脂平板置于采样器内进行采样,然后接种细菌。④ 阳性对照组(无菌蒸馏水+不含中和剂的培养基+试验菌)即用蒸馏水进行喷雾后,用不含中和剂的培养基平板置于采样器内进行采样,然后接种细菌。⑤ 阴性对照(无菌水+不含中和剂的培养基)即用无菌蒸馏水进行喷雾后,用不含中和剂的培养基平板进行采样即可。将各组平板置37℃培养48 h,观察并记录菌落数。
试验结果评价,当第1组6级平板上每级平板不长菌或长菌数少于第3组与第4组对应级别平板长菌数,第2、3、4组组间6级各对应级上的平板长菌数相差均不超过15% ,第5组无菌生长时,为所选中和剂及其浓度适宜。
1.3双长链季铵盐气溶胶空气消毒现场试验选择会议室与歌厅娱乐室作为空气消毒试验场所,首先用FA—l型空气微生物采样器(辽阳应用技术研究所生产)内装不含中和剂的培养基采样平板对试验场所进行消毒前对照组空气采样。然后用TL2003型气溶胶喷雾器(北京达轮医疗电子仪器有限公司生产)以8 ml/m3喷雾量,对试验场所喷雾含2000 mg/L双链季铵盐水溶液,密闭消毒作用30min。按上述采样方法进行消毒后,试验组用含中和剂B的培养基采样。将采样平板置37℃培养48 h,观察并记录菌落形成单位数,计算空气中自然菌消除率。试验重复3次。
2结果
2.1常规方法中和试验结果
3次重复试验结果表明,用含10 g/L吐温80、1g/L卵磷脂的PBS溶液(中和剂A)与含30 g/L吐温80、3 g/L卵磷脂的PBS溶液(中和剂B)均可有效中和含2000 mg/L双链季铵盐的残余作用,中和剂及中和产物对受试菌金黄色葡萄球菌及培养基无影响。
2.2改进方法中和试验结果
中和剂A试验结果表明,第1组各级平板上的菌落数明显少于第3组与第4组对应级别平板菌落数;但第2、3、4组各级平板上菌落数的组间最大差异为54.67% ,中和产物对试验菌有明显抑制作用。故该中和剂不适用于空气消毒试验。
中和剂B试验结果表明,第1组各级平板的菌落数明显少于第3组与第4组对应级别平板菌落数;第2、3、4组各级平板上菌落数的最大差异为14.33% ,中和剂及其产物对试验菌及培养基无明显影响。故该中和剂适用于空气消毒试验。
2.3空气消毒现场试验结果
在室温17—24℃ ,相对湿度40%一75% 条件下,用2000 mg/L双链季铵盐水溶液对两种试验场所进行气溶胶喷雾,施药量8 ml/m3,消毒作用30min,对空气中的自然菌平均消除率分别为95.09%与92.64%。
3讨论
用化学消毒剂气溶胶进行空气消毒,近年来的应用越来越广泛。在评价这些消毒剂对空气消毒效果的中和剂试验中,发现按现行《消毒技术规范》规定的中和试验方法选择出的中和剂在进行空气消毒时,中和剂或中和产物会对试验菌产生抑制作用。在对过氧乙酸进行空气消毒试验时发现,中和剂(硫代硫酸钠)浓度过高会对试验菌产生抑制作用;对双季铵盐进行空气消毒试验时发现,如果中和剂、吐温80、卵磷脂)浓度不足,试验中也会发生抑菌现象。产生此种情况可能主要是因为现行《消毒技术规范》规定的中和试验方法与空气消毒试验条件上不同所致。
本研究模拟空气消毒效果试验方法,以双链季铵盐为消毒剂代表,对常规中和剂试验方法进行了改进。试验结果表明,在常规中和剂试验中确定有效的中和剂,经改进中和剂试验方法验证证明存在抑菌现象。改进的中和试验方法更能准确检测中和剂或中和产物对试验菌的抑制作用带来的影响,减少由于试验方法缺陷导致的试验结果的偏差,提高空气消毒剂评价的准确性。用本实验得到的中和剂,验证双长链季铵盐气溶胶对污染比较严重的歌厅娱乐室空气进行消毒,其消毒效果与有关文献记载一致。关于用季铵盐类消毒剂作为空气消毒,尚需要作系统研究和评价。
 
 

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